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讓專業人員告訴你在實驗室裡操作博日PCR儀時一定要注意的事情

釋出時間↟▩▩·☁:2021-05-11   點選次數↟▩▩·☁:427次

    實驗室操作博日PCR儀注意事項↟▩▩·☁:

    儘管擴增序列的殘留汙染大部分是假陽性反應的原因↟·☁,樣品間的交叉汙染也是原因之一↟↟✘。因此↟·☁,不僅要在進行擴增反應是謹慎認真↟·☁,在樣品的收集▩╃↟₪₪、抽提和擴增的所有環節都應該注意↟▩▩·☁:

    1.戴一次性手套↟·☁,若不小心濺上反應液↟·☁,立即更換手套;

    2.使用一次性吸頭↟·☁,嚴禁與PCR產物分析室的吸頭混用↟·☁,吸頭不要長時間暴露於空氣中↟·☁,避免氣溶膠的汙染;

    3.避免反應液飛濺↟·☁,開啟反應管時為避免此種情況↟·☁,開蓋前稍離心收集液體於管底↟↟✘。若不小心濺到手套或桌面上↟·☁,應立刻更換手套並用稀酸擦拭桌面;

    4.操作多份樣品時↟·☁,製備反應混合液↟·☁,先將dNTP▩╃↟₪₪、緩衝液▩╃↟₪₪、引物和酶混合好↟·☁,然後分裝↟·☁,這樣即可以減少操作↟·☁,避免汙染↟·☁,又可以增加反應的精確度;

    5.最後加入反應模板↟·☁,加入後蓋緊反應管;

    6.操作時設立陰陽性對照和空白對照↟·☁,即可驗證PCR反應的可靠性↟·☁,又可以協助判斷擴增系統的可信性;

    7.儘可能用可替換或可高壓處理的加樣器↟·☁,由於加樣器最容易受產物氣溶膠或標本DNA的汙染↟·☁,最好使用可替換或高壓處理的加樣器↟↟✘。

    如沒有這種特殊的加樣器↟·☁,至少PCR操作過程中加樣器應該專用↟·☁,不能交叉使用↟·☁,尤其是PCR產物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區;

    8.重複實驗↟·☁,驗證結果↟·☁,慎下結論↟↟✘。
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