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給你提煉一篇博日PCR儀的操作注意事項

釋出時間↟▩✘:2022-03-17   點選次數↟▩✘:290次
 
  簡單的說☁₪◕✘,PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成☁₪◕✘,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖複製◕₪•│。
 
  目前☁₪◕✘,常用的技術☁₪◕✘,可以將一段基因複製為原來的一百億至一千億倍◕₪•│。根據DNA擴增的目的和檢測的標準☁₪◕✘,可以將博日PCR儀分為普通PCR儀☁₪◕✘,梯度PCR儀☁₪◕✘,原位PCR儀☁₪◕✘,實時熒光定量PCR儀四類◕₪•│。
 
  博日PCR儀的實驗操作注意事項↟▩✘:
 
  儘管擴增序列的殘留汙染大部分是假陽性反應的原因☁₪◕✘,樣品間的交叉汙染也是原因之一◕₪•│。因此☁₪◕✘,不僅要在進行擴增反應是謹慎認真☁₪◕✘,在樣品的收集✘☁│、抽提和擴增的所有環節都應該注意↟▩✘:
 
  1.戴一次性手套☁₪◕✘,若不小心濺上反應液☁₪◕✘,立即更換手套;
 
  2.使用一次性吸頭☁₪◕✘,嚴禁與PCR產物分析室的吸頭混用☁₪◕✘,吸頭不要長時間暴露於空氣中☁₪◕✘,避免氣溶膠的汙染;
 
  3.避免反應液飛濺☁₪◕✘,開啟反應管時為避免此種情況☁₪◕✘,開蓋前稍離心收集液體於管底◕₪•│。若不小心濺到手套或桌面上☁₪◕✘,應立刻更換手套並用稀酸擦拭桌面;
 
  4.操作多份樣品時☁₪◕✘,製備反應混合液☁₪◕✘,先將dNTP✘☁│、緩衝液✘☁│、引物和酶混合好☁₪◕✘,然後分裝☁₪◕✘,這樣即可以減少操作☁₪◕✘,避免汙染☁₪◕✘,又可以增加反應的精確度;
 
  5.最後加入反應模板☁₪◕✘,加入後蓋緊反應管;
 
  6.操作時設立陰陽性對照和空白對照☁₪◕✘,即可驗證PCR反應的可靠性☁₪◕✘,又可以協助判斷擴增系統的可信性;
 
  7.儘可能用可替換或可高壓處理的加樣器☁₪◕✘,由於加樣器最容易受產物氣溶膠或標本DNA的汙染☁₪◕✘,最好使用可替換或高壓處理的加樣器◕₪•│。
 
  如沒有這種特殊的加樣器☁₪◕✘,至少PCR操作過程中加樣器應該專用☁₪◕✘,不能交叉使用☁₪◕✘,尤其是PCR產物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區;
 
  8.重複實驗☁₪◕✘,驗證結果☁₪◕✘,慎下結論◕₪•│。
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